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基因敲除細胞系的建立


1.服務信息

 

流程分布

周期工作日

提交內(nèi)容

CRISPR設計

2

專業(yè)設計報告

客戶確認

1-2

客戶回復

引物合成

2

獲得引物

質(zhì)粒構建,引物測試及目標基因擴增

  6   

階段報告

  質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞

6-8

階段報告(提供熒光照片)

    活性驗證

7-10

階段報告

  獲得單克隆細胞

35

獲得30個細胞株

單細胞株突變體鑒定

10

總結報告

總周期:3-3.5月

 

2.基因組編輯動物細胞系建系流程圖:

  

 

3.服務流程

 



案例說明

案例展示

案例說明

  建立基因組編輯細胞系的優(yōu)選策略之多個sgRNA同時使用以高效實現(xiàn)目標基因的靶向突變:

  雖然有報道利用一對sgRNA,可以刪除長至200 kb的基因組DNA片段,但是刪除100-200 bp相較而言更容易實現(xiàn),更為重要的同時使用多個sgRNA,可顯著提高基因組靶向突變的成功率,如果實現(xiàn)刪除則有利于后面篩選時的基因型鑒定。

  在哺乳動物的基因組編輯中,一般建議同時使用(測試)3個sgRNA

  以提高工作效率

  

參考文獻
參考文獻

參考文獻

參考文獻

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